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    菌種培養及打管說明
    admin / 2015-01-05

    安瓿瓶凍干管打管說明
     
    一、打管說明
    1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
    2、菌株恢復培養:用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養基,滴入安瓿管內,輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養基試管中,并在建議的條件下培養。
    3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環境下,某些菌種經過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續兩次繼代培養才能正常生長。
    4、復蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
    5、暫不啟開的安瓿及復蘇后需保藏的斜面應于4℃中保藏。
    特別注意事項
    l、微生物菌種應保藏于低溫、清潔和干燥的地方,室溫放置時問過長會導致菌種衰退;
    2、菌種操作應在無菌條件下進行,防止雜菌污染:
    3、斜面菌種保藏時間通常為1-2個月,應根據菌種狀況及時轉接;凍干菌種保藏時間通常為5~10年;
    4、菌種使用過程中如出現雜菌污染或菌種生產性能下降,應及時與微生物菌種查詢網聯系或更換新的菌種。

     西林瓶和甘油凍存管打管說明
     
    二、西林瓶菌種打管復活操作步驟
    1、用 75%酒精棉擦拭西林瓶表面進行消毒。 
    2、在生物安全柜中打開鋁制瓶蓋和膠蓋。 
    3、用無菌吸管吸取 0.5ml 左右液體培養基(《菌種說明書》中固體培養基去掉瓊脂即可)于西 林瓶中將凍干菌粉全部溶解。 
    4、將溶解后的菌懸液轉移至盛有 4~5mL 液體培養基的試管中混勻,可將殘留在吸管中的 1-2 滴菌懸液轉接至固體培養基上。
    5、將液體試管和斜面試管于推薦條件下靜置培養,以液體培養結果為準。
    三、甘油凍存管菌種打管復活操作步驟 
    1、準備好推薦的菌種培養基(見《菌種說明書》)。

    2、將凍存管下半部浸入 37℃溫水中輕輕搖動,使冷凍狀態的菌種懸液迅速融化。如果收到菌種凍存管時菌懸液是融化狀態則需要立即進行轉接培養。 

    3、用 75%酒精棉擦拭凍存管表面進行消毒。

    4、在生物安全柜中打開凍存管瓶蓋,用無菌吸管吸取全部菌懸液,均勻涂布到 2 支試管斜面 或平板上。 
    5、將斜面試管或平板于推薦條件下靜置培養。對于生長緩慢的菌種應持續培養 2 周至更長的 時間。
    四、注意事項 
    1、 所有打管操作都需要無菌操作。需由專業微生物技術人員在相應防護設備中進行,生物危 害程度為三類的菌種應在生物安全柜中操作。 
    2、 西林瓶和凍存管打開后需一次用完,不能留存。 
    3、 菌種經過凍干保藏后,處于休眠狀態,需要轉接 2-3 代恢復活力。
    4、 大部分凍干菌種會在培養幾天后生長。有些菌種第一代恢復生長時會有較長的延遲期,培養此類菌種時需要將培養時間延長至正常培養時間的雙倍時長,甚至 2 周至更長的時間。

    注意:

    如若有菌種復蘇不活或者污染等情況,請在收到菌種后2個月內聯系,逾期不予受理!


    網站:微生物菌種查詢網
    網址:www.pok44.com
    電話:010-53515223
    郵箱:biobw11@sina.com


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