一、細胞簡介
小鼠肺微血管內皮細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。微血管內皮細胞密切參與包括再生、發育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應。細胞呈梭形或多角形，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內皮細胞構成半選擇性屏障，該屏障對于肺氣體交換，調節液體和可溶物在血液與肺間質之間的流動具有重要意義。
二、產品信息
平臺編號：Bio-131285
規格：1×10?Cells/T25培養瓶
細胞信息：MPMEC
細胞名稱：小鼠肺微血管內皮細胞MPMEC
產品規格：T25培養瓶x1；1.5ml凍存管x2
細胞數量：1x10^6；1x10^6
保存溫度：37℃；-198℃
運輸方式：常溫保溫運輸；干冰運輸
安全等級：1
用途限制：僅供科研2類
培養體系：DMEM高糖培養基+20%FBS+1%三抗
培養溫度：37℃
二氧化碳濃度：5%
簡介：小鼠肺微血管內皮細胞MPMEC取自ICR小鼠肺部組織，不規則形態，貼壁培養。
注釋：倍增時間42h
注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產品信息以出庫為準）
三、方法簡介
實驗室分離的小鼠肺微血管內皮細胞采用組織貼塊法并結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
四、質量檢測
實驗室分離的小鼠肺微血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
五、培養信息
包被條件 PLL(0.1mg/ml)，明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
產品貨號 CM-M001
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠肺微血管內皮細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
六、驗收細胞注意事項
1、收到小鼠肺微血管內皮細胞MPMEC細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。
2、收到小鼠肺微血管內皮細胞MPMEC細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到小鼠肺微血管內皮細胞MPMEC細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以加到15％去培養。若細胞迏到80%左右，血清濃度還是在10％。
4、收到小鼠肺微血管內皮細胞MPMEC細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下5-10ML培養基繼續培養：超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
5、將培養瓶置于37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。
6、24小時后，細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘?？梢苑湃?7℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之完全脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2培養。
特別提醒：原瓶中培養基不宜繼續使用，請更換新鮮培養基培養。
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